Naar deze uitspraak werd door vele gemeenteambtenaren reikhalzend uitgekeken. De Afdeling bestuursrechtspraak van de Raad van State (hierna: ‘de Afdeling’) oordeelt in deze uitspraak dat het aantal... Show moreNaar deze uitspraak werd door vele gemeenteambtenaren reikhalzend uitgekeken. De Afdeling bestuursrechtspraak van de Raad van State (hierna: ‘de Afdeling’) oordeelt in deze uitspraak dat het aantal te verlenen exploitatievergunningen voor coffeeshops mag worden gemaximeerd en dat deze vergunningen voor een beperkte duur mogen worden verleend. Deze uitspraak kan daarmee aanzienlijkegevolgen hebben voor zowel exploitanten van coffeeshops als voor de gemeenten. Dit naschrift is als volgt opgebouwd. Eerst wordt stilgestaan bij de feiten van de zaak (par. 2) en de verhouding tussen een gedoogverklaring en een exploitatievergunning (par. 3 en 4). Vervolgens gaan wij in op de beperking van het aantal exploitatievergunningen en de geldigheidsduur daarvan (par. 5). Ten slotte wordt ingegaanop de vraag of mededingingsruimte moet worden geboden voordat een exploitatievergunning kan worden verleend (par. 6). Show less
Termijn van zes weken voor schaarse vergunning kan voldoende zijn voor het indienen van een complete aanvraag, mits potentiële gegadigden zich kunnen voorbereiden.
The conserved region (Fc) of IgG antibodies dictates the interactions with designated receptors thus defining the immunological effector functions of IgG. Amino acid sequence variations in the Fc,... Show moreThe conserved region (Fc) of IgG antibodies dictates the interactions with designated receptors thus defining the immunological effector functions of IgG. Amino acid sequence variations in the Fc, recognized as subclasses and allotypes, as well as post-translational modifications (PTMs) modulate these interactions. Yet, the high similarity of Fc sequences hinders allotype-specific PTM analysis by state-of-the-art bottom-up methods and current subunit approaches lack sensitivity and face co-elution of near-isobaric allotypes.To circumvent these shortcomings, we present a nanoscale reversed-phase (RP) HPLC-MS workflow of intact Fc subunits for comprehensive characterization of Fc proteoforms in an allotype- and subclass-specific manner. Polyclonal IgGs were purified from individuals followed by enzymatic digestion releasing single chain Fc subunits (Fc/2) that were directly subjected to analysis. Chromatographic conditions were optimized to separate Fc/2 subunits of near-isobaric allotypes and subclasses allowing allotype and proteoform identification and quantification across all four IgG subclasses. The workflow was complemented by a semi-automated data analysis pipeline based on the open-source software Skyline followed by post-processing in R. The approach revealed pronounced differences in Fc glycosylation between donors, besides inter-subclass and inter-allotype variability within donors. Notably, partial occupancy of the N-glycosylation site in the CH3 domain of IgG3 was observed that is generally neglected by established approaches. The described method was benchmarked across several hundred runs and showed good precision and robustness.This methodology represents a first mature Fc subunit profiling approach allowing truly subclass- and allotype-specific Fc proteoform characterization beyond established approaches. The comprehensive information obtained paired with the high sensitivity provided by the miniaturization of the approach guarantees applicability to a broad range of research questions including clinically relevant (auto)antibody characterization or pharmacokinetics assessment of therapeutic IgGs. Show less
Gebruik van informatie na sluiting van de aanvraagtermijn. Geen rechtsregel dat een adviseur die bij het horen in bezwaar is betrokken niet betrokken mag zijn bij de inhoudelijke beoordeling.
